壹(yi)、微(wei)生(sheng)物大腸菌群(qun)檢(jian)測(ce)板產品(pin)介紹

1、微(wei)生(sheng)物大腸菌群(qun)檢(jian)測(ce)板原(yuan)理及(ji)適用(yong)範圍
大腸菌群(qun)是評價(jia)食品(pin)衛(wei)生(sheng)質量的(de)重要(yao)指標(biao)之壹，目前已被(bei)廣泛應(ying)用於(yu)食品(pin)衛(wei)生(sheng)檢(jian)驗(yan)工作中。大腸菌群(qun)多(duo)存(cun)在於(yu)溫血(xue)動物糞便(bian)、人類(lei)經(jing)常活(huo)動的(de)場所以(yi)及(ji)有(you)糞便(bian)汙染的(de)地(di)方，大腸菌群(qun)數的(de)高(gao)低(di)，表明(ming)了食品(pin)及(ji)食品(pin)生(sheng)產過程中受(shou)汙(wu)染的(de)程(cheng)度。大腸菌群(qun)檢(jian)測(ce)板含有(you)選擇性培養基(ji)、大腸菌群(qun)特異(yi)性酶(mei)的(de)顯(xian)色(se)指示(shi)劑(ji)和(he)高(gao)分子(zi)吸(xi)水凝(ning)膠(jiao)，運用微(wei)生(sheng)物檢(jian)測(ce)板專(zhuan)有(you)技術(shu)，做(zuo)成壹(yi)次(ci)性快(kuai)速(su)檢(jian)驗(yan)產品(pin)。本產品(pin)適(shi)合(he)於(yu)食品(pin)及(ji)原料(liao)中大腸菌群(qun)的(de)計(ji)數，如消毒(du)牛(niu)乳(ru)、冷(leng)飲和(he)調味品(pin)等(deng)樣(yang)品(pin)的(de)檢(jian)測(ce)，也(ye)可用於(yu)表面(mian)的(de)衛(wei)生檢(jian)測(ce)。
執行(xing)標(biao)準：中(zhong)華人(ren)民共和(he)國(guo)國(guo)家(jia)標準(zhun)《食(shi)品(pin)安(an)全國(guo)家(jia)標準(zhun) 食(shi)品(pin)微(wei)生(sheng)物學檢(jian)驗(yan) 大腸菌群(qun)計數(shu)》（GB 4789.3）；中華人(ren)民共和(he)國(guo)出入境(jing)檢(jian)驗(yan)檢(jian)疫(yi)行業標準(zhun)《食(shi)品(pin)中(zhong)大腸菌群(qun)和(he)大腸桿(gan)菌快(kuai)速(su)計(ji)數法——PetrifilmTM 檢(jian)測(ce)板法》（SN/T 1896）。
2、操(cao)作方法
2.1 樣(yang)品(pin)處(chu)理(li)：取樣品(pin) 25 mL（g）放(fang)入含(han)有(you)225 mL滅(mie)菌磷酸緩(huan)沖液(ye)（或生理(li)鹽水）的(de)取(qu)樣罐或均質(zhi)袋(dai)內(nei)，制成1:10的(de)樣(yang)品(pin)勻液，根據(ju)樣(yang)品(pin)汙(wu)染程度及(ji)檢(jian)驗(yan)需要(yao)，可進壹步(bu)制成10倍遞(di)增(zeng)的(de)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液。
2.2 接(jie)種：壹(yi)般食(shi)品(pin)選(xuan)2～3個(ge)適宜(yi)的(de)稀(xi)釋(shi)度進(jin)行檢(jian)測(ce)，含菌量(liang)少的(de)液(ye)體樣品(pin)（如飲用純(chun)水(shui)和(he)礦泉(quan)水等(deng)）可直接吸取原(yuan)液(ye)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)。將大腸菌群(qun)檢(jian)測(ce)板置(zhi)於(yu)平(ping)坦實驗臺(tai)面，揭開上(shang)層(ceng)膜(mo)，用(yong)無(wu)菌吸(xi)管(guan)吸取1 mL樣(yang)品(pin)勻液滴加(jia)到檢(jian)測(ce)板內(nei)，迅速貼好上(shang)層(ceng)膜(mo)並水(shui)平(ping)晃動檢(jian)測(ce)板，讓樣品(pin)勻液均勻吸附在濾紙上(shang)，靜(jing)置(zhi)10 s左(zuo)右，待樣品(pin)勻液被(bei)吸附在濾紙上(shang)。每(mei)個(ge)稀(xi)釋(shi)度接(jie)種兩(liang)片。做(zuo)好空(kong)白(bai)陰(yin)性對照。
2.3 培(pei)養： 將(jiang)檢(jian)測(ce)板疊在壹起(qi)，倒置(zhi)放(fang)於(yu)培養箱(xiang)內(nei)。培養溫(wen)度為36℃±1℃，培(pei)養15～24h。
3、結(jie)果判讀
培(pei)養後(hou)紙(zhi)片上(shang)的(de)藍(lan)色(se)菌落為大腸菌群(qun)菌落群，選擇菌落數適中（15～150CFU）的(de)紙(zhi)片進行計數。
兩(liang)個檢(jian)測(ce)板的(de)平(ping)均菌落數乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)即(ji)為每(mei)克（或每毫(hao)升）樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)大腸菌群(qun)菌落行程單(dan)位數。
如果所有(you)的(de)稀(xi)釋(shi)度檢(jian)測(ce)板上(shang)的(de)菌落數都小於(yu)15CFU，則計(ji)數(shu)稀(xi)釋(shi)度較低(di)的(de)檢(jian)測(ce)板上(shang)的(de)平(ping)均菌落數乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)報告；
如果所有(you)的(de)稀(xi)釋(shi)度的(de)檢(jian)測(ce)板上(shang)均無(wu)菌落生長(chang)，則以(yi)小於(yu)1乘以(yi)較低(di)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)報告；
如果較高(gao)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)大於(yu)150CFU的(de)檢(jian)測(ce)板時(shi)，可計數壹(yi)半(ban)或者(zhe)1/4，然後(hou)再乘(cheng)以(yi)2或者(zhe)4，即(ji)為檢(jian)測(ce)板上(shang)估(gu)算(suan)的(de)菌落數。
報告單(dan)位以(yi)CFU/g（或CFU/mL）表示(shi)。

4、附加(jia)說明
4.1大腸菌群(qun)檢(jian)測(ce)板不但可以(yi)大大縮(suo)短(duan)檢(jian)測(ce)時(shi)間(jian)，而(er)且(qie)檢(jian)測(ce)結果與傳(chuan)統方法很接(jie)近，符合率(lv)可達90％左(zuo)右。
4.2 如果樣品(pin)的(de)酸堿(jian)度pH 7.0以(yi)下時(shi)，應(ying)先用滅(mie)過菌的(de)堿(jian)性溶(rong)液（如1 mol/L NaOH）調節(jie)到pH6.5～7.5。
4.3 註(zhu)意使用過的(de)檢(jian)測(ce)板上(shang)帶(dai)有(you)活菌，需(xu)及(ji)時(shi)按照生物安(an)全廢棄物處理(li)原則(ze)進(jin)行(xing)處(chu)理。