壹(yi)、高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀主要(yao)特點
高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)法(fa)有“三高壹(yi)廣壹(yi)快(kuai)”的特點：
①高壓：流動相為(wei)液(ye)體(ti)，流(liu)經色(se)譜(pu)柱時，受(shou)到的阻力(li)較(jiao)大，為(wei)了(le)能迅(xun)速通過(guo)色(se)譜(pu)柱，必須對(dui)載(zai)液加高壓。
②高效(xiao)：分(fen)離效(xiao)能(neng)高。可(ke)選(xuan)擇(ze)固(gu)定相(xiang)和流動相以(yi)達到佳分(fen)離效(xiao)果(guo)，比(bi)工(gong)業精(jing)餾(liu)塔和氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)的分(fen)離效(xiao)能(neng)高出(chu)許(xu)多(duo)倍。
③高靈敏度：紫(zi)外(wai)檢測(ce)器(qi)可達0.01ng,進樣(yang)量在(zai)μL數量級(ji)。
④應(ying)用(yong)範(fan)圍廣：百(bai)分(fen)之七十(shi)以上(shang)的有機化合(he)物可用(yong)高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)分(fen)析，特別是高沸點、大分(fen)子、強(qiang)極(ji)性、熱(re)穩定性(xing)差化(hua)合(he)物的分(fen)離分析，顯示(shi)出(chu)優勢。
⑤分(fen)析速度(du)快(kuai)、載液(ye)流(liu)速快(kuai)：較經典液(ye)體(ti)色(se)譜(pu)法(fa)速度(du)快(kuai)得多(duo)，通常分析壹(yi)個(ge)樣品在(zai)15～30分鐘(zhong)，有些(xie)樣品(pin)甚(shen)至在(zai)5分鐘(zhong)內即可(ke)完成(cheng)，壹(yi)般(ban)小(xiao)於1小(xiao)時。
此(ci)外高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)還有色(se)譜(pu)柱可反復使用(yong)、樣(yang)品(pin)不(bu)被破(po)壞(huai)、易(yi)回收等(deng)優點，但也有缺點(dian)，與(yu)氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)相(xiang)比(bi)各(ge)有所(suo)長(chang)，相(xiang)互(hu)補充(chong)。高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的缺點(dian)是有“柱外效(xiao)應(ying)”。在(zai)從(cong)進(jin)樣(yang)到檢測(ce)器(qi)之間，除(chu)了(le)柱子以外的任何死(si)空(kong)間（進(jin)樣(yang)器(qi)、柱接(jie)頭(tou)、連接(jie)管(guan)和檢測(ce)池等(deng)）中，如(ru)果(guo)流(liu)動相的流(liu)型有變化(hua)，被分(fen)離物質(zhi)的任何擴散和滯留(liu)都(dou)會(hui)顯著(zhu)地導(dao)致色(se)譜(pu)峰(feng)的加寬，柱效(xiao)率降低。高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)檢測(ce)器(qi)的靈敏度不(bu)及(ji)氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)。
二(er)、高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀歷史
1906年植(zhi)物(wu)化學(xue)家茨維(wei)特（Tswett）*提出(chu)“色(se)譜(pu)法(fa)”（Chromotography）和“
色(se)譜(pu)圖”（Chromatogram）的概念。他在(zai)論文中寫(xie)到：
“（原文）壹(yi)植(zhi)物色(se)素的石油醚(mi)溶(rong)液從(cong)壹(yi)根(gen)主要(yao)裝(zhuang)有碳酸(suan)鈣(gai)吸(xi)附(fu)劑的玻(bo)璃管(guan)上(shang)端加入，沿(yan)管(guan)濾(lv)下，後用(yong)純石油醚(mi)淋(lin)洗(xi)，結果(guo)按(an)照(zhao)不(bu)同色(se)素的吸(xi)附(fu)順序(xu)在(zai)管(guan)內(nei)觀(guan)察(cha)到它(ta)們(men)相(xiang)應(ying)的色(se)帶(dai)，就象光譜壹(yi)樣(yang)，稱(cheng)之為(wei)色(se)譜(pu)圖。”
1930年以(yi)後，相(xiang)繼出(chu)現(xian)了(le)紙(zhi)色(se)譜(pu)、離子交(jiao)換色(se)譜(pu)和薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)等(deng)液相(xiang)色(se)譜(pu)技術。
1952年，英(ying)國學(xue)者(zhe)Martin和Synge 基於他們(men)在(zai)分配(pei)色(se)譜(pu)方(fang)面的研究(jiu)工作(zuo)，提(ti)出(chu)了(le)關(guan)於氣(qi)－液(ye)分(fen)配(pei)色(se)譜(pu)的比(bi)較(jiao)完整的理論和方(fang)法(fa)，把(ba)色(se)譜(pu)技術向(xiang)前(qian)推(tui)進(jin)了(le)壹(yi)大(da)步，這是氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)在(zai)此後的十(shi)多(duo)年間發展十分迅(xun)速的原(yuan)因(yin)。
1958年，基於Moore和Stein的工(gong)作(zuo)，離子交(jiao)換色(se)譜(pu)的儀器(qi)化導(dao)致了(le)氨基酸分析儀的出(chu)現(xian)，這是近代液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的壹(yi)個(ge)重要(yao)嘗試，但分(fen)離效(xiao)率尚(shang)不(bu)理想。
1960年中(zhong)後期，氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)理論和實(shi)踐(jian)的發展，以及(ji)機械、光學(xue)、電子等(deng)技術上(shang)的進(jin)步(bu)，液(ye)相色(se)譜(pu)又(you)開始活躍(yue)。到60年代末期把(ba)高壓泵(beng)和化學(xue)鍵合(he)固定相(xiang)用(yong)於液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)就出(chu)現(xian)了(le)HPLC。
1970年中(zhong)期以後，微(wei)處(chu)理機技術用(yong)於液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)，進(jin)壹(yi)步(bu)提高了(le)儀器(qi)的自(zi)動化水平和分析精(jing)度(du)。
1990年以(yi)後，生(sheng)物工(gong)程(cheng)和生命(ming)科學(xue)在(zai)和國內(nei)的迅(xun)速發展，為(wei)高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)技術提(ti)出(chu)了(le)更(geng)多(duo)、更(geng)新的分(fen)離、純化(hua)、制(zhi)備(bei)的課(ke)題(ti)，如(ru)人類基因(yin)組計(ji)劃，蛋白質組學(xue)有HPLC作(zuo)預(yu)分(fen)離等(deng)。