壹、半自(zi)動(dong)酶(mei)標(biao)儀半(ban)自(zi)動酶(mei)標(biao)儀自(zi)檢(jian)校準
1 外觀
酶(mei)標(biao)儀上(shang)應有儀器(qi)名稱，型(xing)號，編(bian)號，生產(chan)廠家(jia)，出(chu)廠日(ri)期和電(dian)源(yuan)電(dian)壓(ya);各(ge)調(tiao)節(jie)旋(xuan)鈕(niu)，按(an)鍵(jian)和開關均(jun)能正(zheng)常工作(zuo)，外表面(mian)無(wu)明(ming)顯機械損傷(shang);顯示(shi)文(wen)字應清楚完整。
2 酶(mei)標(biao)儀的穩定(ding)性(xing)(漂(piao)移(yi))
選(xuan)用492nm波(bo)長，在(zai)吸光(guang)度(du)0.0A處，測(ce)定(ding)標稱值為(wei)1.0A的光(guang)譜中性濾光片(pian)(測(ce)定(ding)操(cao)作(zuo)按(an)儀(yi)器(qi)說明進(jin)行)，記(ji)錄儀器(qi)示(shi)值或(huo)均(jun)值，10min後(hou)再(zai)次(ci)記(ji)錄儀器(qi)示(shi)值或(huo)均(jun)值，前(qian)後(hou)兩(liang)次測定值之(zhi)差(cha)不應超過±0.005A。
3 吸光(guang)度(du)測定(ding)的準(zhun)確(que)度(du)
選用(yong)405，492和620 nm波(bo)長，以空氣為(wei)參(can)比(bi)，分別測定(ding)標(biao)稱值為(wei)0.5和1.0A的光(guang)譜中性玻(bo)璃(li)濾光片(pian)，用(yong)測(ce)試(shi)板代替(ti)酶(mei)標(biao)板，按(an)儀(yi)器(qi)說明連續測(ce)定3次(ci)，按(an)下(xia)式(shi)計算準確(que)度(du):AA=1/3(A、+A。+A3)-A:(A:為(wei)標準值(zhi))。
4 吸光(guang)度(du)測定(ding)的重復性
波(bo)長選擇(ze)同(3)，在(zai)酶(mei)標(biao)板*排(pai)加註(zhu)空(kong)白(bai)溶液(ye)，第(di)二排(pai)加入濃(nong)度(du)為(wei)200rig/ml的重鉻(ge)酸(suan)鉀(jia)溶液(ye)，重復測定5次。記(ji)錄每次(ci)測定(ding)的第(di)二排(pai)吸光(guang)度(du)值，取(qu)第(di)二排(pai)任壹孔吸光(guang)度(du)值與各(ge)次對(dui)應孔吸光(guang)度(du)值。按(an)下(xia)式(shi)計算重復性:
5 酶(mei)標(biao)儀的線性(xing)
選(xuan)用(yong)540nm波(bo)長，將標稱值0.5，1.0A中性濾光片(pian)分(fen)別放入測(ce)試(shi)板樣本位置(zhi)中，以空氣為(wei)參(can)比(bi)，各重復測定3次;然(ran)後(hou)將以上(shang)兩(liang)片中性濾光片(pian)疊(die)加(jia)後(hou)置(zhi)於(yu)測試(shi)板的同壹孔位中，重復測定3次。線性(xing)誤差(cha):
式中A1為(wei)*片中性濾光片(pian)吸光(guang)度(du)均(jun)值，A:為(wei)第(di)二片(pian)中性濾光片(pian)吸光(guang)度(du)均(jun)值，A1，2為(wei)兩(liang)片中性濾光片(pian)疊(die)加(jia)後(hou)的吸光(guang)度(du)均(jun)值。
6 測(ce)定(ding)速(su)度(du)的檢(jian)定(ding)
選用492nm波(bo)長，放人(ren)96孔酶(mei)標(biao)板進(jin)行測定(ding)，用(yong)秒表計測儀器打(da)印(yin)出全(quan)部(bu)數據的時(shi)間。
酶(mei)標(biao)儀除(chu)了在(zai)選(xuan)購(gou)時(shi)，應盡(jin)可能(neng)自檢(jian)外，在(zai)使用(yong)中也應定期檢定(ding)，以保證酶(mei)標(biao)儀測(ce)定(ding)的有效(xiao)性(xing)。
附:200ttg/ml重鉻(ge)酸(suan)鉀(jia)溶液(ye)的配(pei)制(zhi)
將重鉻(ge)酸(suan)鉀(jia)固體(ti)試(shi)劑(ji)放人(ren)稱量瓶中(去(qu)蓋(gai))置(zhi)於(yu)烘箱(xiang)中，在(zai)105±5℃下(xia)烘2h後(hou)，置(zhi)於(yu)幹燥(zao)器內冷卻30min，在(zai)分(fen)析(xi)天(tian)平上(shang)準確(que)稱取(qu)o.2829g，置(zhi)於(yu)100ml燒杯(bei)中，用0.05mol/L稀硫酸(suan)溶解(jie)後(hou)，移(yi)入500ml容(rong)量(liang)瓶中，以少量0.05mol/L稀硫酸(suan)洗(xi)燒杯(bei)3次(ci)，洗(xi)液(ye)並(bing)入容(rong)量(liang)瓶中，用0.05mol/L稀硫酸(suan)稀釋至刻(ke)度(du)線，搖(yao)勻。